Dominująca-ujemna mutacja GFI1B w zespole szarej płytki AD 6

Te nieprawidłowości są bardzo podobne do tych obserwowanych w komórkach uzyskanych od członków rodziny dotkniętej zespołem szarej płytki (Figura 3E), co wskazuje, że ekspresja GFI1BTr jest wystarczająca do wywołania anomalii megakariocytowych i że działa ona w sposób dominujący-ujemny. Analizy komórkowe
Badania z udziałem myszy z nokautem Gfi1b wykazały, że Gfi1b odgrywa ważną rolę w rozwoju kilku linii krwiotwórczych.15,17,19 U ludzi, GFI1B jest wymagany do różnicowania in vitro linii erytrocytów i megakariocytów.18 Obserwowaliśmy tworzenie kolonii megakariocytów komórki były znacznie częstsze w próbce szpiku kostnego od dotkniętych członków rodziny niż w próbkach od zdrowej osoby. Ponadto, kolonie od dotkniętego członka rodziny były większe niż te ze zdrowej kontroli (Figura 3A i Fig. S7 w Dodatku Uzupełniającym); jest to zgodne ze zwiększoną liczbą megakariocytów w próbce z biopsji dotkniętej członkiem rodziny III.2 (rysunek 1I). Continue reading „Dominująca-ujemna mutacja GFI1B w zespole szarej płytki AD 6”

Dominująca-ujemna mutacja GFI1B w zespole szarej płytki AD 5

Aby przetestować tę hipotezę, wprowadziliśmy mutację skracającą w wektorze ekspresyjnym GFI1B i przeprowadziliśmy testy represji transkrypcji wykorzystując promotor Gfi1 jako zwalidowany cel Gfi1B.25 Zgodnie z brakiem nienaruszonego wiążącego DNA palca cynkowego obserwowaliśmy, że GFI1BTr ma nie tłumić promotora Gfi1, podczas gdy nieumyślne GFI1 i GFI1B (rys. 2C i ryc. S5 w dodatkowym dodatku). W przypadku koekspresji, GFI1BTr hamował represję z udziałem nieumutantnego GFI1B, wskazując, że mutant przeszkadza niezmutowanemu GFI1B w sposób dominujący-negatywny (Figura 2C). Continue reading „Dominująca-ujemna mutacja GFI1B w zespole szarej płytki AD 5”

Dominująca-ujemna mutacja GFI1B w zespole szarej płytki AD 4

W doświadczeniach kotransfekcji GFI1BTr hamowało represję za pośrednictwem GFI1B. T bary reprezentują standardowe błędy. Barwienie May-Grünwald-Giemsa w panelu D pokazuje nieprawidłowe megakariocyty (po prawej) charakteryzujące się cechami dysplastycznymi, w tym hipolobulacją jądra i wieloma oddzielonymi jądrami. Te nieprawidłowe megakariocyty rozwinęły się po retrowirusowej ekspresji GFI1BTr w liniowych komórkach progenitorowych c-kit-mysiej linii, po którym nastąpiło różnicowanie megakariocytów. Continue reading „Dominująca-ujemna mutacja GFI1B w zespole szarej płytki AD 4”

Dominująca-ujemna mutacja GFI1B w zespole szarej płytki AD 3

Panele od F do I wykazują nieprawidłowości w próbce z biopsji szpiku uzyskanej od dotkniętego członka rodziny III.2. Barwienie Laguesse w panelu F ujawnia zwłóknienie szpiku kostnego w stadium I, składające się z ogniskowej sieci drobnych włókien retikuliny o ciemnym zabarwieniu, które rozciągają się od zatok. Barwienie hematoksyliną i eozyną w panelu G pokazuje megakariocyty, które są zarówno większe, jak i mniejsze niż normalnie, o kształtach odbiegających od normalnej okrągłej formy (strzałki). Niektóre jądra są nieregularne i hiperchromatyczne. Continue reading „Dominująca-ujemna mutacja GFI1B w zespole szarej płytki AD 3”

Mutacje PLS3 w osteoporozie związanej z chromosomem X ze złamaniami AD 4

W przypadku tego rzadkiego wariantu częstość alleli wynosiła 0,01 wśród 1872 mężczyzn w badaniu ESP i 0,02 wśród 5189 mężczyzn w badaniu Rotterdam, wyniki różniły się znacznie od częstości wśród 95 pacjentów płci męskiej (p = 0,006 i p = 0,04 w dwóch badaniach). dokładne badanie Fishera dla dwóch porównań). Analiza cDNA
W Family 3 (Patient 3.II-1) wykryto częściowe pominięcie egzonu 7 i użycie tajemniczego miejsca składania, c.748 + 36, (Rys. S4A i S4B w Dodatku Uzupełniającym). Continue reading „Mutacje PLS3 w osteoporozie związanej z chromosomem X ze złamaniami AD 4”

Mutacje PLS3 w osteoporozie związanej z chromosomem X ze złamaniami AD 3

Wpływ niedoboru PLS3 na cytoszkielet F-aktyny badano w fibroblastach skórnych za pomocą mikroskopii immunofluorescencyjnej. Postawiliśmy hipotezę, że PLS3 może być zaangażowany w mechanosensing osteocytes. Mechaniczne obciążenie w postaci płynnego naprężenia ścinającego zwiększa wytwarzanie tlenku azotu w komórkach kostnych, 13 więzadłach przyzębia i fibroblastach dziąsła.14. W przypadku braku tkanki kostnej od pacjentów, badaliśmy odpowiedź na naprężenie ścinające w płynie fibroblastów skórnych od sześciu pacjentów z mutacjami PLS3, w porównaniu z trzema pacjentami z molekularnie potwierdzoną osteogenezą, niedoskonałością typu I i ośmioma grupami kontrolnymi. Continue reading „Mutacje PLS3 w osteoporozie związanej z chromosomem X ze złamaniami AD 3”

Mutacje PLS3 w osteoporozie związanej z chromosomem X ze złamaniami AD 2

Pacjent 4.II-1 otrzymał diagnozę osteoporozy i złamań osteoporotycznych w wieku dorosłym. Badanie fizykalne nie wykazało nieprawidłowości, a zwłaszcza nie zaobserwowano pozakręgowych cech osteogenezy niedoskonałej. Oprócz chodu w chodzie u dwóch braci (pacjentów 1.IV-7 i 1.IV-8), które zniknęły z nieznanych przyczyn, nie zgłoszono żadnych zaburzeń nerwowo-mięśniowych. Dostępne radiogramy nie wykazały nieprawidłowości w rozmiarze lub kształcie kości. Continue reading „Mutacje PLS3 w osteoporozie związanej z chromosomem X ze złamaniami AD 2”

Mutacje PLS3 w osteoporozie związanej z chromosomem X ze złamaniami

Plastyn 3 (PLS3), białko zaangażowane w tworzenie wiązek filamentów aktyny (F-aktyny), wydaje się być ważne dla zdrowia kości u ludzi, na podstawie patogennych wariantów w PLS3 w pięciu rodzinach z osteoporozą związaną z chromosomem X i złamaniami osteoporotycznymi. które tutaj publikujemy. Właściwości regulujące pracę kości PLS3 zostały poparte analizami in vivo u danio pręgowanego. Ponadto, w dodatkowych pięciu rodzinach (opisanych mniej szczegółowo), do których skierowano diagnozę lub wykluczono osteogenezę imperfecta typu I, znaleziono rzadki wariant (rs140121121) w PLS3. Continue reading „Mutacje PLS3 w osteoporozie związanej z chromosomem X ze złamaniami”

Dominująca-ujemna mutacja GFI1B w zespole szarej płytki AD 8

Mutacja w zespole szarej płytki wprowadza kodon stop, który powoduje skrócone białko GFI1B. Usuwany region obejmuje cztery aminokwasy, które bezpośrednio wchodzą w interakcję z DNA. Rzeczywiście, ekspresja GFI1BTr nie hamowała ekspresji genu, ale hamowała funkcję nie mutanta GFI1B. Wskazuje to, że zespół szarej płytki może być spowodowany nie przez haploinowy efekt GFI1B, ale przez dominujące negatywne hamowanie niezmutowanego białka. Continue reading „Dominująca-ujemna mutacja GFI1B w zespole szarej płytki AD 8”

Efektywność kosztowa leczenia HIV jako zapobieganie w parach osób zdrowych ad 5

Liczba transmisji obejmuje transmisje zarówno pierwszego, jak i drugiego rzędu. W Afryce Południowej wczesny ART spowodował natychmiastowy, duży spadek liczby rzutowanych transmisji (rys. 1A i rys. S4A w dodatkowym dodatku). Różnica w częstości transmisji była osłabiona w czasie, ponieważ coraz więcej pacjentów zaczęło otrzymywać terapię w grupie z opóźnionym ART. Continue reading „Efektywność kosztowa leczenia HIV jako zapobieganie w parach osób zdrowych ad 5”