Wrażliwość genetyczna na astmę – nadreaktywność oskrzeli u matczynego genetyka atopii ad

Badanie krewnych obejmowało standardowy kwestionariusz oddechowy (zmodyfikowana wersja kwestionariusza British Medical Council z dodatkowymi pytaniami na temat objawów i terapii alergii i astmy), badanie czynności płuc, pomiar odpowiedzi oskrzeli na wziewną histaminę, testy skórne i pomiar surowicy całkowite IgE.30,31 Poziom całkowitej IgE w surowicy (wyrażony jako jednostki międzynarodowe na mililitr) zastosowano jako wskaźnik atopii i zmierzono metodą immunoenzymatyczną w fazie stałej (Pharmacia Diagnostics, Uppsala, Szwecja). Wykorzystano średnią duplikatów próbek. Test powtórzono, jeśli różnica między powtórzonymi próbkami przekroczyła 5 procent. Analiza segregacji poziomów całkowitego IgE log10 w surowicy sugerowała recesywne dziedziczenie wysokich poziomów IgE w tej populacji.21 Średnie poziomy IgE związane z niskimi IgE i wysokimi fenotypami IgE wynosiły 38 i 437 jm na mililitr, odpowiednio.21 W rozkładzie częstotliwości, poziom 100 jm na mililitr najlepiej wyróżniał się wysoko z grupy o niskim fenotypie; dlatego określiliśmy osoby o podwyższonych poziomach IgE w surowicy jako o poziomach powyżej 100 jm na mililitr.
Reaktywność oskrzeli testowano u członków rodziny zgodnie z metodą de Vriesa i wsp.32, ponieważ ta metoda była stosowana do oceny probantów w latach 1962-1970. Aby zbadać reakcję oskrzeli, badani najpierw wdychali rozcieńczalnik przez 30 sekund normalnego oddychania i następnie wziewne dawki histaminy, które były podwajane co 5 minut (od 0,5 mg na mililitr do 32 mg na mililitr). Test zatrzymano, gdy natężona objętość wydechowa w jednej sekundzie (FEV1) spadła o 20 procent lub więcej lub osiągnięto najwyższe stężenie histaminy (32 mg na mililitr). Dla osobników z mniejszym niż 20 procent ubytkiem FEV1 przy najwyższym stężeniu histaminy, arbitralnie przypisano wartość progową 64 mg histaminy na mililitr. Najniższe stężenie histaminy, które wywołało spadek FEV1 o co najmniej 20 procent, zostało określone jako wartość progowa. Osobnicy zostali sklasyfikowani jako dodatni lub ujemni dla nadreaktywności oskrzeli na podstawie ich wartości progowej histaminy (z dodatnim stanem zdefiniowanym przez wartość <16 lub <32 mg na mililitr). Nadreaktywność oskrzeli wyrażano również jako stężenie prowokacji histaminy, powodujące 20-procentowy spadek FEV1 (PC20) i oszacowano ją przez ekstrapolację z krzywej dawka-odpowiedź.
Metody molekularne
DNA wyekstrahowano z obwodowych leukocytów z członków 84 rodzin, jak opisano wcześniej (nie było DNA z 8 dodatkowych rodzin, które badano poprzednio). 21, 31 Genomowy DNA rozcieńczono do stężenia 200 .g na mililitr dla amplifikacji. Proste loci33 z powtórzeniem sekwencji zostały wybrane z bazy danych genomu (Welch Library, Johns Hopkins University, Baltimore) i obejmowały te stosowane do wykazania połączenia z głównym locus regulującym całkowite IgE w surowicy.21. Produkty były amplifikowane przez łańcuchową reakcję polimerazy34 i zwymiarowany zgodnie z wcześniej opisanymi metodami. 21 Próbki traktowano jak opisano w Weber i May33 z niewielkimi modyfikacjami
[więcej w: endoproteza stawu biodrowego cennik, rehabilitacja prądy, przychodnia na batorego ]

Powiązane tematy z artykułem: endoproteza stawu biodrowego cennik przychodnia na batorego rehabilitacja prądy